特应性供体的状态不影响树突状细胞对主要草花粉过敏原Phl p 5的摄取-技术前沿-资讯-生物在线

特应性供体的状态不影响树突状细胞对主要草花粉过敏原Phl p 5的摄取

作者:TG亚太公司 2022-11-01T09:47 (访问量:6294)

秋高气爽,正是外出旅游的大好时光,然而,有不少人在外出时出现打喷嚏等类似感冒的症状。人们通常认为春季才是花粉过敏的多发季节,其实夏秋季8月至10月期间也是花粉过敏症的高发期。秋季是植物成熟的季节,也是许多草本植物花粉的传粉时节。干燥的空气,较大的风速,以及大量的植物花粉,使得包括过敏性鼻炎在内的一些过敏病症的产生,具备了条件。

那么,关于花粉过敏我们做了哪些研究呢?此文章首次递交因为荧光样本中不同通道数据定量困难的技术问题被拒稿,后结合TissueGnostics公司定量分析软件被顺利接收。


特应性供体的状态不影响树突状细胞对主要草花粉过敏原Phl p 5的摄取

树突细胞(DC)是免疫系统的前哨,在抗原的识别与摄取,以及呈递给原始T细胞以引发刺激与诱导中起重要作用。DC对过敏原的内化和内吞降解是诱发T细胞所需的重要步骤。

在该文章中,主要研究了纯化的重组非糖基化花粉过敏原、phl p5和来自向日葵的天然非特异性脂质转移蛋白、SF-nsLTP与人单核细胞衍生的树突细胞(MoDC)的结合和内化。

利用免疫荧光染色检测具有低亲和力(CD23)或高亲和力受体(FcεRI)的Phl p5的共定位情况,以及通过通过早期内体抗原(EEA1)和溶酶体相关膜蛋白1(LAMP1)的共染**况,对早期(EE)和晚期内体(LE)中过敏原进行了定位研究。通过实验证明Phl p5以及SF-nsLTP可以与来自草花粉过敏和非过敏个体的MoDC结合,而且是非优先的同时摄取。


在病理学实验部分,应用奥地利TissueGnsotics公司的TissueFAXS扫描产品及TissueQuest分析软件。


Fig1. FcDRI和CD23在MoDC中表达并结合IgE。

将源自过敏和非过敏供体的单核细胞的MoDC与Phl p 5在4 ℃ 温育,使用针对IgE、CD23和FcεRIα的抗体固定,透化和免疫染色Cy3-Phl p5刺激的MoDC。使用TissueFAXS显微镜系统定量表面结合的IgE和IgE受体。结果来自过敏和非过敏组的两个独立实验的数据。在散点图的右角指示的IgE,FcεRI和CD23阳性细胞的百分比。

在本研究中,使用无血清培养基生成MoDC,并且在第7天检测来自未成熟MoDC的上清液中的特异性IgE,但是由于染色通道的限制, 无法同时给出量化三种组分(Phl p 5,IgE和CD23或FcεRI)的PCC值。然而,在随后的实验中,使用TissueQuest软件对这三种成分进行的代表性定量分析Bet v 1摄取在IgE阳性和IgE阴性细胞中同样有效,与其他研究者发表的文章结论相一致(Smole et al., 2015)。


研究者通过免疫荧光显微镜,观察了来自植物花粉过敏和非过敏个体的MoDC同时摄取吸入过敏原和食物过敏原的情况。发现了MoDCs对Phl p 5和SF-nsLTP的摄取机制,并且表明其在植物花粉过敏和非过敏个体之间没有显着差异。通过建立体外细胞实验模型,在分子水平上研究过敏原摄取的方法,可以有助于鉴定抗原加工和呈递给T细胞的相关途径。

利用TissueGnostics公司的软件分析功能,可以从荧光数据分析的角度入手,解决了荧光样本中不同通道数据定量困难的技术问题,通过数据结果与其他研究者的结论相印证,体现了科学研究的严谨性。

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